蛋白表达时操作方法对结果有影响吗
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/24 08:57:53
蛋白表达时操作方法对结果有影响吗
我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声细胞破碎后要用4℃ 20000g 离心20min,但是我每次都是把它分装到2ml离心管里用小型离心机室温下12000rpm离心 5min……
这会影响结果吗
我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声细胞破碎后要用4℃ 20000g 离心20min,但是我每次都是把它分装到2ml离心管里用小型离心机室温下12000rpm离心 5min……
这会影响结果吗
您好!没有结果是没有看到表达条带?如果没有表达的话,应该找找你质粒的原因了.一般破碎后使用12000rpm离心 5min没有任何问题,能将上清沉淀充分分离,另你的蛋白在上清沉淀里都找不到?
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