为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/31 08:21:34
为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
不知道具体的情况是什么,只能有几种猜测:
1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的.
2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环的质粒电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时电泳结果与实际大小差不多.所以要电泳得到正确的质粒大小,最好单酶切.
3.如果载体酶切的粘末端一致,很有可能造成载体自连,两个载体连在一起,或者插入载体的目的片段非单拷贝,虽然这两种情况发生的概率非常小.
建议:
1.酶切验证.
2.实在不放心可以送出去测个序
1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的.
2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环的质粒电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时电泳结果与实际大小差不多.所以要电泳得到正确的质粒大小,最好单酶切.
3.如果载体酶切的粘末端一致,很有可能造成载体自连,两个载体连在一起,或者插入载体的目的片段非单拷贝,虽然这两种情况发生的概率非常小.
建议:
1.酶切验证.
2.实在不放心可以送出去测个序
目的基因片段与载体质粒的选择?
提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒?
高中生物 质粒基因工程中为什么质粒有抗病基因那么改质粒进入细胞后细胞就能抗该病,质粒是目的基因载体,它和细胞是两个分开的
用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物?
载体和质粒的区别?载体与质粒的概念有什么不同?
PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑.
为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切的图示
载体和目的片段连接目的片断与载体的摩尔比大于3-10:1.摩尔数怎么确定?除了用分光光度计测OD,同门说跑胶能估算,请问
RT 已经获得了载体质粒和目的基因,把他们结合获得重组体的实验怎么做?
我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回