您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/08/31 08:03:49

您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗
就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影响吗?如果有影响,如何排除?期待您的回答!

你刚连接完就来酶切检测?看看分子克隆的书啊,
连接产物先转化到大肠杆菌中,比如top10,让菌在LB agar plate上生长16hrs,然后挑取单克隆,在2ml LB中培养起来（8hrs）,少量抽提质粒后再用限制性内切酶进行酶切检测,将含有正确重组质粒的菌大量培养,抽取大量质粒~
连接完就酶切,连接酶和限制酶会互相抑制,而且即使切开了,你跑胶也看不到的.

为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急目的基因片段与载体质粒的选择? 用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物? 您好,将目的片段连接T载体后为什么要作感受态?目的是什么?T载体就是质粒吗,属性是什么? 用同种限制酶切质粒和目的基因DNA,连接后,产生的载体-载体连接物不是也有标记基因而且在培养基上生长吗为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切的图示可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照限制行内切酶切割质粒和目的基因后,目的基因是怎么和质粒连接的? 基因表达载体和重组质粒的区别目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒?