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AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/07/07 17:07:10
AFLP选择性扩增
这是怎么回事啊!
预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!
还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发上来大家核对一下啊.
我的是5=》3
Ecor1接头上链 CTCGTAGACTGCGTACC
Ecor1接头下链 AATTGGTACGCAGTCTAC
Mse1接头上链 GACGATGAGTCCTGAG
Mse1接头下链 TACTCAGGACTCAT
还有就是大家在合成接头时,是不是也是65度水浴10min,在室温下放置2个小时?然后4°冰箱保存下?
MARKER是2000的
我觉得你在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,pcr应该更难拉出片段,不可能比第一次拉的还要长.我觉得这是跑胶的原因,你每次用的dna loading的不同,电泳缓冲液的不同都会导致结果会变一变,我建议你把第一次预扩增的产物和第二次预扩增的产物同时跑下胶,看是不是还是偏大.
我没有做过AFLP,只是根据我的经验推理的,因此你的第二个问题回答不了,建议你去看看分子克隆的标准protocol.
PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增 PCR中,PCV2的引物扩增后,跑电泳的条带在多少bp? 设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物g 我想问根据同一个基因设计的两个引物,都在小麦中扩增,扩增片段大小是否一样? 知道引物序列怎么推算扩增片段 PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在10 PCR引物设计问题我是要扩增一个片段,加上双酶切位点,片段就那么大,我就需要那么大加酶切位点?这引物怎么设计?是不是只要 16S RDNA作为通用引物,用于细菌总DNA 提取后跑PCR,扩增出的片段是多少个bp呢? 关于引物和目的基因的关系.针对某基因设计的同一对引物在不同人的基因组中扩增的片段一定一样吗 特异引物PCR问题各位大牛,小弟初涉分子生物实验,最近在用设计好的特异性引物扩增保守序列,可是总也是扩增不出来,常常是只 在进行PCR实验扩增时如何设计引物?为什么要用引物?原理是什么? pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子?