作业帮HindIII和EcoRI双酶切用NEB哪个缓冲液,还有BamHI 和HindIII双酶切用哪个
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/08/28 07:21:39
HindIII和EcoRI双酶切用NEB哪个缓冲液,还有BamHI 和HindIII双酶切用哪个
缓冲液,都是Neb公司的,这两个双酶切那种比较好点.
缓冲液,都是Neb公司的,这两个双酶切那种比较好点.
Enzyme Cat # Temp Supplied NEBuffer SAM % Activity in NEBuffer
1.1 2.1 3.1 CutSmart
EcoRI R0101 37°C NEBuffer EcoRI no 25 100* 50 50*
HindIII R0104 37°C NEBuffer 2.1 no 25 100 50 50
Double Digest Recommendations for EcoRI + HindIII:
Digest in NEBuffer 3.1 at 37°C.
This buffer is not supplied with either enzyme.
At least one enzyme has < 100% activity in this buffer,so additional units of enzyme and/or longer incubation time may be necessary.
推荐的是buffer 3.1,但是这个buffer这两个酶都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以酶的用量得增加,而且时间得加长.
如果实在不行,就分别切好了.
1.1 2.1 3.1 CutSmart
EcoRI R0101 37°C NEBuffer EcoRI no 25 100* 50 50*
HindIII R0104 37°C NEBuffer 2.1 no 25 100 50 50
Double Digest Recommendations for EcoRI + HindIII:
Digest in NEBuffer 3.1 at 37°C.
This buffer is not supplied with either enzyme.
At least one enzyme has < 100% activity in this buffer,so additional units of enzyme and/or longer incubation time may be necessary.
推荐的是buffer 3.1,但是这个buffer这两个酶都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以酶的用量得增加,而且时间得加长.
如果实在不行,就分别切好了.
关于实验中的酶切反应小弟我最近在做酶切,做的是HindIII和EcoRI的双酶切,两个酶的缓冲液不同,所以准备两次酶切,
如何评价不同内切酶之间的活性差异?如HindIII和EcoRI它们两个谁的活性更高?
双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶
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kpnI 与EcoRI 双酶切体系所需缓冲液,是NEB 公司的
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