已知动物PRL基因序列如何设计引物 已解决
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/07 05:31:02
已知动物PRL基因序列如何设计引物 已解决
2,上游引物设计:选取正向5’-3’的基因序列约23bp左右,copy下来;在这段序列的5’端加上你的上游酶切位点(一般6bp),再在之前加入两个任意碱基作为保护碱基;序列为:保护碱基(2bp)+上游酶切位点(6bp)+基因起始序列5’-3’,引物碱基总长约28-30bp.
3,下游引物设计:将序列反相互补,得到互补链序列,选取5’-3’的基因序列约20bp左右,同样在5’端加上下游酶切位点和保护碱基;一般情况下还需要在酶切位点和基因之间加上stop codon.序列为:保护碱基(2bp)+下游酶切位点(6bp)+stop codon(3bp)+基因互补序列起始序列5’-3’,引物碱基总长约28-30bp
4,检查:(1)引物长度;(2)上游酶切位点是否移码,如果移码,则应增加1-2个碱基恢复读码框;(3)如果下游没有设计终止密码子,也应检测是否移码,PCR能否顺利终止,不行则休正;(4)退火温度,一对引物的退火温度不能相差太大,否则应调节碱基使之满足要求.
3,下游引物设计:将序列反相互补,得到互补链序列,选取5’-3’的基因序列约20bp左右,同样在5’端加上下游酶切位点和保护碱基;一般情况下还需要在酶切位点和基因之间加上stop codon.序列为:保护碱基(2bp)+下游酶切位点(6bp)+stop codon(3bp)+基因互补序列起始序列5’-3’,引物碱基总长约28-30bp
4,检查:(1)引物长度;(2)上游酶切位点是否移码,如果移码,则应增加1-2个碱基恢复读码框;(3)如果下游没有设计终止密码子,也应检测是否移码,PCR能否顺利终止,不行则休正;(4)退火温度,一对引物的退火温度不能相差太大,否则应调节碱基使之满足要求.
已知引物序列,如何知道目的基因的长度
已知到某一基因的部分序列想要设计引物继续扩序列,选取哪一块设计引物
scleraxis的基因序列 设计引物
如何读基因序列,设计引物时的保守区指那一段序列
如何查找乳腺癌突变基因TNRC9的基因序列?如何设计引物?
如何通过已知的引物序列查询基因的全序列
已知蛋白质N端序列,要想扩增其全基因,怎样设计引物?
已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长
如何让设计引物有一段基因序列,想做表达,设计引物是直接根据这段基因序列设计吗?还是查找出这段基因的ORF,根据这段ORF
PCR的条件是已知目的基因的核苷酸序列?既然知道目的基因的核苷酸序列,为什么还要设计引物呢?直接根据已知序列写出引物核苷
能否用已知植物的某个基因序列设计引物到另一种植物里去PCR,能否得到这个基因的序列呢?
如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物