有没有做膜蛋白提取的,
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/13 02:04:39
有没有做膜蛋白提取的,
膜蛋白很难做的,做得也不太多.给你一点点参考的资料
膜蛋白丰度低,难制备,表达的目标蛋白质缺乏足够的插膜及折叠过程,或者缺少翻译后修饰,异原过表达的膜蛋白质经常表达量较低或者无活性.
如果是构建成组氨酸标签的膜蛋白.
可以试试裂解缓冲液:20mM 磷酸钠,100mM NaCl,2mM MgCl2,20mM 咪唑,0.5 mM TECP,1mg/ml 溶菌酶,1mM EDTA ,1-2%的去污剂,pH7.4
His柱的结合缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,20-40mM 咪唑,0.5mM TECP,1-2%
去污剂,pH7.4(合适的咪唑浓度要依不同蛋白质的特点而定,一般20-40mM 咪唑对大多数蛋白质都比较合适).
预洗缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,20-40 mM 咪唑,0.5mM TECP,0.03%
DDM,1-2%去污剂,pH7.4.
洗脱缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,500 mM 咪唑,0.5mM TECP,0.03%
DDM,1-2%去污剂,pH7.4.
膜蛋白丰度低,难制备,表达的目标蛋白质缺乏足够的插膜及折叠过程,或者缺少翻译后修饰,异原过表达的膜蛋白质经常表达量较低或者无活性.
如果是构建成组氨酸标签的膜蛋白.
可以试试裂解缓冲液:20mM 磷酸钠,100mM NaCl,2mM MgCl2,20mM 咪唑,0.5 mM TECP,1mg/ml 溶菌酶,1mM EDTA ,1-2%的去污剂,pH7.4
His柱的结合缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,20-40mM 咪唑,0.5mM TECP,1-2%
去污剂,pH7.4(合适的咪唑浓度要依不同蛋白质的特点而定,一般20-40mM 咪唑对大多数蛋白质都比较合适).
预洗缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,20-40 mM 咪唑,0.5mM TECP,0.03%
DDM,1-2%去污剂,pH7.4.
洗脱缓冲液:20mM 磷酸钠,500mM NaCl,500 mM 咪唑,0.5mM TECP,0.03%
DDM,1-2%去污剂,pH7.4.
有谁知道Ⅰ型跨膜蛋白和Ⅱ型跨膜蛋白的定义和区别?
膜蛋白的功能
膜蛋白做生物催化剂例子?
膜蛋白有哪些生物学功能?
怎样证明膜蛋白的流动性?
生物做叶绿素中色素的提取与分离时 为什么不同的色素之间会有空白 怎么没有色素的颜色 别说是因为溶解度不
细胞间的识别.细胞的癌变与膜蛋白质有密切的关系错哪?
细胞质膜的膜蛋白的生物学功能
细胞膜上的球状膜蛋白的主要功能
提取根腐线虫DNA后,做PCR,用电泳检测却没有条带,可能原因有哪些?
工业废水的电路板蚀刻液提取铜有没有气体产生 有哪些有毒气体...或者物质
在SPSS中做因子分析每次只能提取一个公共因子,怎样才能提取多个因子?软件操作没有问题,是不是指标选择问的问题.