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提RNA组织保存需要收集上皮性卵巢癌组织提取RNA和蛋白质,1、要提RNA和蛋白质,取的组织需要分开保存么?2、由于条件

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/27 12:32:59
提RNA组织保存
需要收集上皮性卵巢癌组织提取RNA和蛋白质,1、要提RNA和蛋白质,取的组织需要分开保存么?2、由于条件限制,没有小的液氮罐,考虑RNAlater比较贵,组织取好后半小时内放进-80℃冰箱,行不行?这样可以保存多久?3、组织取好后需不需要立即用PBS洗掉上面的血液?
法师药材店 的,但组织取好半小时再放进- 80℃冰箱,拖的时间太长了;如果是生物体取下,半个小时样品内部的RNA就全降解了,尤其是 癌细胞!
如果是培养的细胞系,在常温还是可以多活一段时间:
无论是生物离体组织还是细胞系,用PBS 洗洗都是比较好的,洗掉一些其他液体成分又保持 目的组织的短时间正常生理活动,但要快!
综合你的条件:没有小的液氮罐,事先将研钵内加满液氮,液氮会持续的挥发,继续加一直到研钵温度也超低至研钵里的液氮不沸腾了,取样后用pbs快速冲洗下,就在液氮里研磨,一次性研磨搞定,然后加入 Trizol,用量大概是50mg/ml,癌细胞不好提取啊,成分复杂,
再问: 非常感谢您的建议,但我是医院手术室去取病人的标本,取好后放冰盒立即送去实验室,动作很快,跑过去也只能保证半小时送进实验室的冰箱。现在准备借同学的液氮罐,取好标本马上放液氮罐,再送去实验室。不知道这样会不会好些,没有later也不知道能保存几个月?这个是给老板跟别人合作的,我只帮收标本,我自己在做别的课题,所以不能马上提RNA,要保存标本。
再答: 借了同学液氮罐,就可以用液氮速冻从手术室取出的样本了,在时间上应该是可以保证的。 不建议把样品先放冰盒再跑半小时放到冰箱,成功率太小了; 在手术室取出来的样品肯定是癌症组织了,,必须用液氮,祝您成功!!!