如何从水稻病杆分离稻瘟病菌种 稻瘟病菌种
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/13 04:01:26
如何从水稻病杆分离稻瘟病菌种 稻瘟病菌种
1,选择典型的单个病斑,用剪刀或者解剖刀从病斑边缘切取小块(3-4mm)病斑数块.
2,将病组织放入70%酒精中浸3-5s,再在0.1%汞液中消毒30-60s.
3,用无菌操作法将病组织移至平板培养基上,每皿放4-6块.放之前吸去多余水,防止感染.
4,培养皿倒置防止于23-25摄氏度恒温箱暗培养.一般3-4d观察菌丝生长情况.
5,若病组织小块上均长出较为一致的菌落,则多半为要分离的病原菌.在无菌条件下,用接种针自菌落边缘取小块移入斜面培养基,在23-25摄氏度恒温箱内暗培养,数10天后,观察菌落生长情况,如无杂菌即得到所需纯菌株,变可放于0-4摄氏度保存.
第二种是单孢培养
取发病较好的组织,在灭菌蒸馏水中浸泡6-12小时,再将病组织放入70%酒精中浸3-5s,再在0.1%汞液中消毒30-60s.取出吸干后,将病组织置于湿度100%,恒温23-25摄氏度的恒温箱中暗培养12-24h,取出去除两端,并在滤纸上把水吸干,然后轻轻将其孢子震落清水培养基上,然后再显微镜下挑取单孢培养.
2,将病组织放入70%酒精中浸3-5s,再在0.1%汞液中消毒30-60s.
3,用无菌操作法将病组织移至平板培养基上,每皿放4-6块.放之前吸去多余水,防止感染.
4,培养皿倒置防止于23-25摄氏度恒温箱暗培养.一般3-4d观察菌丝生长情况.
5,若病组织小块上均长出较为一致的菌落,则多半为要分离的病原菌.在无菌条件下,用接种针自菌落边缘取小块移入斜面培养基,在23-25摄氏度恒温箱内暗培养,数10天后,观察菌落生长情况,如无杂菌即得到所需纯菌株,变可放于0-4摄氏度保存.
第二种是单孢培养
取发病较好的组织,在灭菌蒸馏水中浸泡6-12小时,再将病组织放入70%酒精中浸3-5s,再在0.1%汞液中消毒30-60s.取出吸干后,将病组织置于湿度100%,恒温23-25摄氏度的恒温箱中暗培养12-24h,取出去除两端,并在滤纸上把水吸干,然后轻轻将其孢子震落清水培养基上,然后再显微镜下挑取单孢培养.