重叠PCR是做什么用的?具体原理是什么?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/23 15:24:08
重叠PCR是做什么用的?具体原理是什么?
overlap-PCR主要在构建载体、拼接DNA片段、制造点突变、或者人工合成DNA片段的过程中用到.具体原理你可以去查一些参考书,说的比较仔细.简单地说就是把A基因3'端的序列加到扩增B基因的上游引物5'端,把B基因5'端的序列加到扩增A基因的下游引物的3'端.分别扩增A、B两基因,这样A的3’端和B的5‘端就形成了互补.切胶回收这两个PCR产物,稀释并混合,以此为模板,以A基因的上游引物和B基因的下游引物为引物对,扩增.这样就可以得到AB拼接到一起的产物.