简述分光光度法进行定量定性分析的基础
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/02 23:49:32
简述分光光度法进行定量定性分析的基础
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:
根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:
A=abc
式中A为吸光度,b为溶液层厚度(cm),c为溶液的浓度(g/dm^3),a为吸光系数.其中吸光系数 与溶液的本性、温度以及波长等因素有关.溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除.
由上式可知,当固定溶液层厚度l和吸光系数 时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系.在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲线.在分析未知溶液时,根据测量的吸光度A,查工作曲线即可确定出相应的浓度.这便是分光光度法测量浓度的基本原理.
根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:
A=abc
式中A为吸光度,b为溶液层厚度(cm),c为溶液的浓度(g/dm^3),a为吸光系数.其中吸光系数 与溶液的本性、温度以及波长等因素有关.溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除.
由上式可知,当固定溶液层厚度l和吸光系数 时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系.在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲线.在分析未知溶液时,根据测量的吸光度A,查工作曲线即可确定出相应的浓度.这便是分光光度法测量浓度的基本原理.
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