如何检查提取的总RNA的完整性?具体的方法和步骤?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/28 09:37:45
如何检查提取的总RNA的完整性?具体的方法和步骤?
对少量样品进行琼脂糖凝胶变性电泳,样品应有清晰完整条带,无弥散.不同物种总RNA条带不同,在网上可以查到相关对照.另外,个别物种如某些昆虫,提取方法不同,RNA完整性亦不同.
具体方法,一般情况下取0.5ugRNA样品,补水至总体积约3~10ul,以4、5uL为佳.加入适量loading buffer及EB(或其他染色剂)混合.按照RNA样品种类不同配置1.3%~1.7%浓度的琼脂糖凝胶.缓冲液配方网上可查.进行电泳.并在紫外灯下观察条带.
全程保证无RNA酶环境,且越长的RNA分子越容易降解,可依次判断您的总RNA样品完整性.
具体方法,一般情况下取0.5ugRNA样品,补水至总体积约3~10ul,以4、5uL为佳.加入适量loading buffer及EB(或其他染色剂)混合.按照RNA样品种类不同配置1.3%~1.7%浓度的琼脂糖凝胶.缓冲液配方网上可查.进行电泳.并在紫外灯下观察条带.
全程保证无RNA酶环境,且越长的RNA分子越容易降解,可依次判断您的总RNA样品完整性.