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Ni-NTA纯化的原理,详细点(键之间是如何结合的)

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/08 19:49:01
Ni-NTA纯化的原理,详细点(键之间是如何结合的)
Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸).在蛋白 上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出.Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱,梯度洗脱,咪 唑竞争性结合到硫酸镍上,目的蛋白就被洗脱了,这时候收集浸出液,那么里面就是你要的目的蛋白,然后透析掉咪唑就行了.