高手帮我看一下我的初步引物设计有什么问题!

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/10/06 11:57:11

高手帮我看一下我的初步引物设计有什么问题!
=CG1147=
5’- ACAGATGGTCGCTGACTGTGC-3’:21bp,G+C=57.1 %,Tm=62
3’- GCACAGGAGATTAGCCCTTT-5’:20bp,G+C=50.0 %,Tm=56
(5’-TTTCCCGATTAGAGGACACG-3’)
=CG6919=
5’- GTATCAGGGCCCTCGACTTTCG-3’:22bp,G+C=59.1 %,Tm=66
3’- GATTTCGTTGTCGGTGTCG-5’:19bp,G+C=52.63 %,Tm=54
(5’-GCTGTGGCTGTTGCTTTAG-3’)
=CG6989=
5’- AGAGCGCTACAAGCCAAAG -3’:19bp,G+C=52.6 %,Tm=54
3’- GCTACACGTCCTCTAGGTCTAAC-5’:23bp,G+C=52.2 %,Tm=66
(5’-CAATCTGGATCTCCTGCACATCG -3’)
=CG7078=
5’- ACGGAAGGAATATCGCAAC-3’:21bp,G+C=50.0 %,Tm=62
3’- CTCACTTAGCAGCGTGTAC-5’:19bp,G+C=52.6 %,Tm=54
(5’-CATGTGCGACGATTCACTC -3’)
=CG7485=
5’- TGCAACTCAAAGCGACAGACC-3’:21bp,G+C=52.4 %,Tm=60
3’- CGTAGGGTTTGCTCTTATCG-5’:20bp,G+C=50.0 %,Tm=56
(5’-GCTATTCTCGTTTGGGATGC-3’)

你的这些引物看起来还可以.一般我看一对儿引物好不好,要看这几个方面,
一、退火温度差异大不大,一般1-5度之内的退火温度差异都可以忍受,当然越接近越好.这一点上,你的这几个引物都可以.
二、G+C含量,一般不要大于60%,不要小于40%.这一点上,你的这几个引物也都符合要求.
三、3'端的碱基组成.一般保证扩增的特异性,要求3'端的碱基以G,C为主较好,尤其是最后一个碱基,最好是G或C.这一点上,你的引物也不错.
所以,我觉得你的引物应该能用得比较好.
当然,我也见过一些软件会预测引物能不能形成二聚体,形成发卡结构,等等,但是这些因素对引物效率的影响不是很大,而且很多引物都或多或少会有二聚和形成发卡结构的情况,所以设计的时候其实不考虑也没什么问题.
根据我的经验,保证了我提到的3点,然后选择了合适的退火温度,PCR都会良好的运行的.如果PCR还是运行的不好,也应该考虑其他的因素,比如模板啦,延伸时间啦,等等

请帮我看一下这篇文章有什么语法问题, 求PCR引物设计哪位朋友帮我设计一个引物,用下面的序列,最好有设计步骤,满意答案后再加30分,tgagaaaaca ac 英语高手帮我看一下这句话是否有语法问题. 请英语高手帮我看一下作文哪里有问题,虚心求教帮我看一下这篇初一的英语作文有什么问题我想初步了解一下经济学,我应该看什么书, 高手帮我看一下这几句英语有什么语法错误或者用词不当? 高手帮我看一下托福作文英语翻译因为想了解问题和句子看不太懂希望有英文高手帮我翻一下不要翻译软体我看的出来喔以下- identify th 有哪位高手帮我看一下这几道英语的同义句转换.紧急! 有English高手可以帮我看一下这段话里的语法错误吗? 请帮我看一下有什么问题,有没有语法错误,用词是否正确等,）