菌落PCR技术鉴定阳性重组

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/07/13 20:21:29

菌落PCR技术鉴定阳性重组
菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?
那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢?

再答：
当一段外源基因插入载体序列中,这段外源基因的两端就是质粒的序列,对不对?所谓通用引物,就是以外源基因两端的质粒序列设计的引物,一般是用在测序当中的.
测序的时候,为了省事,就让测序公司用通用引物测序.所以,如果用通用引物测序,扩增的就是：上游质粒序列+外源基因+下游质粒序列
你这个问题问的蹊跷...
在pcr第一步高温变性的过程中,菌体就会破裂,释放出质粒,应该说此时大多是环状质粒,但是在接下来的反复变性,复性的过程里,难免会出现断裂的情况.
但是不管怎样,你是要鉴定阳性重组质粒,也就是说你扩增的是插入质粒序列中的外源基因,而且,你用的引物肯定是特异的.
所以,不管是环状还是线性,都没多大关系啊.

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