最近在做5race,得到很多大小不同的序列,请问哪位童鞋知道cDNA 的完整性怎么判断啊

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/09 09:52:28

1.做5'RACE前,RNA要先用磷酸酶处理,在脱帽,然后再连接人工序列
2.一般基因的转录起始点最多只有少数几个,你既然得到很多,说明你在做连接的时候RNA有降解,或者PCR非特异性很多,有没有做巢式PCR来确证?
3.如果nested PCR还是有很多条带,那就是你的RNA有问题,建议重新提样本,不要急着拼接序列
再问：是有做2轮nest PCR 的，第二轮电泳就一条带，但是连载体后，鉴定的带就大小不一了。汗。。为什么我的手册上没有写要去磷酸化的，是直接用那个TdT 加多聚dC那个方法，然后用锚定引物去P
再答：汗。。为什么我的手册上没有写要去磷酸化的，是直接用那个TdT 加多聚dC那个方法，然后用锚定引物去P -----------这就是原因了。没有事先去磷酸化，adaptor就加在所有的RNA5‘端了（包括降解的）。所以你要重做。建议参考Invitrogen的RACE说明书，上面有详细说明。

我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列克隆出牛的leptin基因的cdna全长序列?（用race）已知一个cDNA的3'端部分序列,得到该基因的全长cDNA 我最近在构建RNAi载体.在寻找目的基因cDNA与其他基因的非同源序列时,是与DNA比对,还是与cDNA?谢已知一个cDNA3'端部分序列,设计实验得到该基因的全部cDNA 给出一段dna序列,怎么知道它是不是cdna 怎么判断沉淀在不同溶液中溶解度的大小? 老鼠吃了老鼠药怎么判断死在哪哪位有经验的高手知道啊 mRNA反转录中使用olig（t）18做引物所得到的是单链cDNA吗?如果是的话如何才能得到双链的cDNA啊? 请教你那个已知一个基因的很多个体的DNA序列用什么软件怎么做可以得到A、T、C、G的各自平均百分比请问：怎么做已知蛋白序列的3级结构. NCBI上能查mRNA序列吗,是不是只能查到对应cDNA的序列,如果能直接查到mRNA序列的话,能否告知一下怎么查?