作业帮分离分子量大于20000的蛋白质,选用什么型号的葡聚糖凝胶
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/07/18 01:05:47
SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围6%胶50-150kD8%胶30-90kD10%胶20-80kD12%胶12-60kD15%胶10-40kD所以12%足矣
知道分子式的话,自己计算
不知道分子量的情况下就尽可能选择浓度高的分离胶,因为浓度低的胶很有可能蛋白就跑出去了.先用高浓度的胶跑一次,然后看条带再调整下分离胶浓度再做一次就行了.另外,一般快速测定蛋白浓度的方法就是用分光光度计
可以用SARTORIUSSARTOlabp-20,上海摩速公司有021-56902220
大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快.小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程
useSephadex™G-50.LookatthefollowingsiteforthefractionationsizesbydifferentSephadex.Becausethep
G-251000-5000
一抗的使用和分子量没有关系.我觉得分子量小的,应该融合有标签之后,再使用抗体吧.如我们常见的GST标签的兔源抗体,His标签鼠源抗体等等.
如果想利用蛋白分子量大小不同进行分离的话,可用superdex75.不过如果蛋白聚集,以多体形式存在,导致分子量过大,可能就要换用superdex200来分离了.如果几种蛋白分子量差距不大,可以尝试用
只用sephadex分离效果很差的,特别是分子量差异比较小的时候,基本没有什么分离效果.可以先过离子交换柱：阴离子交换和阳离子交换,这样能除掉很多的蛋白,在过sephadex.
蛋白质含量不同,花生分离蛋白中的蛋白质含量更高.
目的蛋白加上标签蛋白的总分子量,当然会有误差.像GST这种标签很大的,有30kd左右.而FLAG,HIS等都比较小.
目的蛋白才16kDa,有些小,但是可以分出来,所用的方法是1加大凝胶的浓度2缓冲液用Tricine而不是Tris
Kr-氪（78）Xe-氙（124）Rn-氡（211）都是稀有气体
买个蛋黄,蛋白分离器好了,很便宜的,不买的话你可以把整个蛋打到有孔的勺子上,那蛋清会自动流下去,就可以轻易的取蛋黄了
1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶,而分子量特别大的可采用含丙烯酰胺4%的凝胶,由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成不同程度交链结构,其空隙度可在一
110*300-(300-1)*18=27618