实时荧光定量PCR曲线不好看
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/04 20:44:04
荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊
tpcr的机器会给出cT值和fluorescence的值,cDNA值自己计算
1做标曲才可以算出这对引物的扩增效率(其斜率),方便用pfaffl方法来进行相对定量(得到的结果相对精确一点),否则只能默认扩增效率为2,用2^-ddCt(Livak)法来计算2做标曲才可以绝对定量.
PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合
小说的文字有很多都不是最准确的,既然上面写的是“实时”,那么就应该是实时荧光定量PCR,否则普通PCR做不到“实时”.所以是一回事.
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能
1纳摩尔(nmol)=1000皮摩尔(pmol)9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答:加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没
内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin.或者18srRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说
首先你这样做出来的统计没有意义.应该是至少3次独立实验,而不是重复3次PCR.如果3次试验,每次重复3次(取平均值算一次).然后先定各个基因在对照组的值为一,再算出其他组该基因的相对量,比如内参CT值
在设置反应程序时,在最后加一步
打开软件-setup-advacedsetup-左手setup中第一行experimentproperties中有一项是whichreagentsdoyouwanttousetodetecttheta
最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了一般用的是灭菌的双蒸水保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别
你好你的情况是小三羊病毒是阴性这个时候基本上属于休眠状态传染性很小或者基本上不传染病毒没有复制在正常人病毒范围内你的肝功能正常是不需要治疗的如果你想怀孕的话是可以的但是要等怀孕后三个月注射高效免疫球胆
完全两个不同的概念,梯度PCR是指你的PCR仪在设置的时候可以同一时间不同位置设置一个从高到低的温度梯度,以便在不知道退火温度的情况下选择一个最适宜的退火温度.二实时荧光定量PCR是通过再PCR过程中
看标准曲线是否反映出了标准物质的真实浓度再问:那请问标准曲线中的R2代表什么意思?为什么说R2>0.99可信度就高?再答:R2决定系数,英文(coefficientofdetermination),有
聚合酶链式反应(PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增.在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析.无论定性
溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60℃升至95℃时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看
是的,这几个都是定量pcr.因为它能实时检测,所以又叫实时定量pcr.末端标记说的是它探针末端标记有检测基团
1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.
你的病毒量若是小于10^3,就说明没问题,若大于的话就是阳性,受乙肝病毒侵染.你的是10的2次方,没问题的!想了解详细点,去查下乙肝两对半,和肝功能,就行了!