引物 功能基因表达

不需要只要你扩增出来的包含了该基因的完整CDS序列上面有起始密码子和终止密码子再问：多谢你的回答。我没有表达清楚我的意思。我是从一段基因上118-600碱基的位置，扩增目的基因，这一段基因没有起始密码

利用基因敲除,使的其他基因不能表达,我们所要研究的基因进行表达,观察生物的性状发生什么变化,从而来确定基因的功能.但因为基因有连锁性,就是多个基因决定一个性状,所以研究起来比较困难.现代基因组计划的目

在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧

你看,你分别获得了1-1200nt以及1000-1400nt这两段序列,那么中间有200bp长度的序列是重叠的,对吧?也就是说你已经从序列信息上获得了这个CD区所有的序列信息.如果你只是需要序列信息的

构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!

必须知道你的载体类型.才能确定你的基因引物的酶切位点和目的片段之间是否应该添加一个碱基,防止移码呀~

1.首先这应该是个融合表达载体.应该考虑后面的读码框问题.就是应该适当在后面的酶切位点前加入0-2个碱基.使得你的目的基因和egfp在同一读码框内.2.KOZAK序列在真核细胞中表达有作用,这就看你后

理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/194473617?report=genbank

您应该使用巢式PCR来做这个实验.无论您是先提RNA再做反转录,还是直接从DNA中获得基因,考虑到模板的复杂性,都应当使用巢式PCR.建议您先从目的基因的上下游设计一段引物,即外引物,再根据目的基因上

我知道和使用过的U6内参基因只有两个：RNU6-1和RNU6-2.前一个就是常见的u6,后一个有时被称为u6b.在我的大鼠RNA样本当中,u6表达量有些太高,u6b的Cq值与我的目标miRNA比较接近

现在你到了基因序列的网站,最下面的那一大段就是外显子2到9的序列.一般设计RT-PCR引物需要跨外显子交界,这样可以提高特异性.你可以先拷贝外显子2的序列（216..289）atggaggagccgc

翻译不出来.首先在转录水平上能转录出全场mRNA其次但是到翻译水平是,核糖体会沿着mRNA从3‘端向5’端滑动,遇到第一个atg开始翻译,此后遇到终止子停止翻译.因此你的蛋白很难被翻译出来.但是,终止

1,顺式作用元件的作用.比如,启动子,增强子,弱化子,终止子.2反式作用因子的作用.比如各类转录因子TFI,TFII,TFIII等.3.环境诱导的基因表达强度调控机制.比如lac操纵子在乳糖存在情况下

泛素(ubiquitin,ubi)基因,后面当然是泛素(ubiquitin,ubi)基因的引物了

首先,上下游引物20多个bp,4种碱基,想在基因组上找到2个一样的排列的情况是几乎不可能的事.所以,你只要确定了上下游引物,那么得到的就一定是你要的基因.其次,能问这个问题,说明lz对pcr的原理貌似

太复杂了,你想要的学生引他人文献的顺序直接去搜索,只要您的目的地是非常罕见的基因的引物浓度没有工作浓度10nm的梯度

直接设计只要包含了整个CDS区就可以再问：哦，那CDS和ORF是一样的吗，怎么查找基因的CDS区啊再答：恩差不多回事ORF是DNA上的CDS是mRNA上的看你模板用的是基因组DNA还是cDNA了反正就

克隆基因的编码框时,必须从ATG开始或UTR处开始.当你想表达这个基因时,PCR产物必须包括完整的读码框；当你需要该基因融合GFP时,不仅需要从ATG开始,终止密码子必须突变掉,而且目的基因与GFP必

那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问：谢谢，但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计？可以设计在基因的非翻译区，然后扩非翻