引物中,有一个引物是长片段
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/06 18:45:20
就是加酶切位点了呗一般长了是升高了不过不用管酶切位点的再问:也就是说,我的xxxxxNNNNN的Tm值和NNNNN一样了么?再答:计算出来的值肯定不一样不过你做的时候还是按照原来的退火温度就行了P不出
PCR的引物需要软件设计,然后送到生物公司合成,PCR后得到的DNA序列里是包含引物序列的.再问:引物成分是什么
一般PCR使用两条引物,前后各一条,与模版DNA结合上后,前后的引物形成复制起始位点,共同向中间扩增,直到连上,一次扩增完成.
这是针对逆转录pcr而言,所谓的跨外显子就是一个引物(比如上游引物)、出现在两个外显子交界,那么做RT-PCR时,dna由于2个外显子被内含子隔开,引物就不会起作用了
prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合
PCR作用的物质是单链DNA合成cDNA或作用于mRNA,与双链无关
解题思路:在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合,进行复制。解题过程:解析:引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中,DNA聚合酶不
引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制.引物是已知序列的DNA小片段.
最好不要有引物二聚体的产生
引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链.体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针
随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.
一、可以使用oligo6或者primer5等软件设计.用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数.二、如果你的序列同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经
Tm值本来就是人为定的一个预测值,三个Tm值代表的是不同的计算方法,常用的是第三种2*AT+4GC.看退火温度时,酶切位点和保护碱基一般是不考虑在内的,因为pcr扩增时这段序列一般是不跟模板结合的,所
直接设计只要包含了整个CDS区就可以再问:哦,那CDS和ORF是一样的吗,怎么查找基因的CDS区啊再答:恩差不多回事ORF是DNA上的CDS是mRNA上的看你模板用的是基因组DNA还是cDNA了反正就
童鞋你画个图就明白了,这两句话没有矛盾啊.延伸方向是5端到3端,即是说新加的碱基要往3端添加不是吗?
是DNA,即使你要做翻转录PCR使用的引物也会是DNA,因为DNA要比RNA稳定很多,并且PCR的原理是依照半保留复制的原理进行的.
2758长的片段对引物没有啥特别的要求,25个bp以上的就行.关键是聚合酶的选择,要选保真性好的能过扩增长片段的酶.
引物二聚体跑的最快,速度超过了loadingbuffer指示剂.二聚体条带弥散,若你的目的片段和此片段有差距,基本可断定此为二聚体
不是一回事.随机引物:我们在不知道研究目标任何信息情况下,利用合成好了的任意序列的引物(可以买得到),可能扩增出来的产物条带数目不定;随机引物可能会在全基因组范围内有结合位点.通用引物:一般是指某基因