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为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/01 08:45:16
为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?
还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用

Tm值本来就是人为定的一个预测值,三个Tm值代表的是不同的计算方法,常用的是第三种2*AT+4GC.看退火温度时,酶切位点和保护碱基一般是不考虑在内的,因为pcr扩增时这段序列一般是不跟模板结合的,所以计算时也不考虑,只是PCR条件可能需要一些优化.二级结构40度我不懂是什么,一般看二级结构只是主观的看看,太严重的就不要了.G值不知道指的是什么.