把一个载体上的片段切下来连接到另一个载体上,但没有相同的酶,怎么做
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/19 13:20:50
1)利用DNA连接酶便可以将目的基因(已经剪切下来的)连接到质粒载体上2)目的基因的获得:利用限制性内切酶(限制酶).这种酶具有专一性...可以识别特定的回文序列来进行剪切.3)如果你想得到一种基因,
答:导线与用电器串联,流过导线的电流与流过用电器的电流相等,电热水壶的功率较大,通过它的电流较大,台灯的功率较小,流过台灯的电流较小,由焦耳定律Q=I2Rt可知,导线电阻R不变,通过导线电流I越大,电
1、黏性末端DNA的连接:单酶切黏性末端、双酶切黏性末端、不规则黏性末端2、平末端DNA的连接:直接连接法、同聚物加尾法、衔接物连接法、DNA接头连接法、PCR法引入酶切位点的连接1、限制性内切酶链接
T载体分两种.一种是末端带有A的典型的T载体,这样的T载体可以与taq酶扩增出来的片段连接,另一种是平末端的T载体,这种T载体末端没有A,它用于以pfu或者是phusion这样的高/超保真酶扩增出来的
二楼正解.不过你的T4ligase浓度是多少?你的insertionDNA和vector浓度又是多少?一般来说商业用T4ligase不会少于20,000u/ml,你的insertionsize又有5k
目的基因和载体比例最好再核对一下,连接时间放久一点试试
用的是T-simple吗?如果不是simple载体,有可能切开的不是你引入的的没切位点,而是载体本身的再问:用的是T-simple啊,发现酶切条带都变大了再答:大了多少?是用的takara的pmd18
只是酶切位点上的6个或8个碱基相同而已.中间的片段序列是不同的.看图:你怎么知道序列是一样的呢?内切酶识别的是酶切位点上的序列,而不是整个序列!
重组DNA
是定向克隆粘末端连接?如果不是有连接反了的可能再有一种可能就是送去测序的菌液有问题我有次是同样的片段测序,菌液没出来,用测序引物PCR的产物测序就合适了,可能菌液污染了
细胞核中遗传物质的载体是染色体,它上面具有的一个个片段是基因.
外形可以知道地球直径,体积可求.重力G已知,第一宇宙速度什么的可推淂重量,就是M,密度就能求出来了.白矮星密度是由结构推算出来的,比如全部由原子核构成,或全部由中子构成(中子星),只要算出原子核密度或
一般来说很难同时连基因和载体相连,首先要用相同的限制性内切酶切割基因和载体,使基因和载体产生相同的黏性末端,才可以使基因和载体相连如果要将两个不同的基因同时连接到一个载体上,那就需要用相同的限制性内切
此长方体的底面积:128/8=16(平方厘米)所以此长方体的体积:16*22=352(立方厘米)【底面积乘高(长)】
这个你单酶切最好是要过夜,而且跑电泳尽量时间长一些,如果有一条带,就说明差不多完全切开了,如果害怕不安全,可以把这条带切胶回收纯化,用纯化后的连接,自连的可能性会小一些
如果酶切时间过长,可能会出现星号活性的影响,酶切位点的识别特异性会下降.
PUC19是个正control,就是一定会出clone的,如果没有,就是操作步骤有问题看你的protocol就是重复做一遍这样的话还不如一起做涂板以后直接放37度啊补充:根据你的说法,从“连接产物”里
应为PCR扩增出来的是混合物,酶切回收后才基本是纯的目的片段.载体一般不用PCR扩增,一般是质粒来源,也需要用切口一致的酶消化回收.之后连起来就好了再问:那PCR扩增出来的混合物里除了目的片段还有什么
要分情况讨论的.1,若沿底面的对角线切,则所得为一个三棱拄有9条棱.2,若沿平行对角线切,则为底面有三个直角的五棱拄,有15条棱,3.若过一个底面正方形的顶点切,则为底面是一个直角梯形的四棱拄有12条
启动子有自己的碱基序列会进行识别再问:大侠,如果我插入两个目的基因片段,如何控制他们两个的表达量呢再答:放在特定的培养基中基因的表达是先复制进行转录和翻译所以是由基因本身控制的