BSA蛋白电泳条带
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/29 04:11:37
MARKER有好多种,你看看你用的是哪种,每种都会有个说明书告诉你你的MARKER的每条带指示是多大,然后看你的电泳图中亮条带对应的是MARKER的哪个位置
核糖体RNA的含量最高,因此这三条带最明显,可是其实不只是这三条,可能你们实验条件有限,只看到3条了,我实验中有时候能看到很多条
有没有可能,有环状超螺旋DNA、开环DNA与变性的线型DNA三种空间构想,导致跑出3条带
中间的是RNA
可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问:感谢回答,我会试试调节亮度。请问,这跟电泳时使用的染色液有关系吗
深浅表示含量的多少宽度没啥表示吧是你泳道大小决定的
co-ip跑出来的两个蛋白,如果大小不一样,肯定是两条带的,跑WB前会让蛋白质变性,他们之间的结合不存在了跑出来粗是因为co-ip相当于一个纯化的过程,没有co-ip的样是检测一大堆蛋白里面你需要的蛋
用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.再问:那你后来是怎么解决这个问题的呢?是bufferB溶解的时候
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
分子量68KD.BSA用的多主要是便宜,其他一些纯蛋白是非常贵的,差价几万倍都是可能的.
目的蛋白加上标签蛋白的总分子量,当然会有误差.像GST这种标签很大的,有30kd左右.而FLAG,HIS等都比较小.
这个问题不具体,很难回答啊.BSA本身就是一种蛋白,它的浓度就是它的含量.如果假设你这个问题是这么问的:抗体中,一般BSA蛋白的含量是多少?为了保护蛋白,通常会加入0.1%-1%,或者2mg/ml-1
如果是用扫描仪扫描的图,可以通过软件编辑出深浅比较鲜明的图,但是测量RF不准确.建议使用凝胶成像系统,测量RF比较准确凝胶成像目前国产技术已经比较成熟,上海天能的不错,价格比较实惠
紫外吸收法原理大多数蛋白质由于有酪氨酸和色氨酸的存在,在紫外光280nm有吸收高峰,可以进行蛋白质含量的测定.但是核酸在280nm也有吸收,干扰测定,不过核酸的最大吸收峰在260nm.Warburg等
主带显著的情况下,很可能是引物聚合体.如果没有出现显著的你想要的主带,则是非特异扩增产物.第一种情况没事不用理会,第二种情况需要筛查模版中与引物的非特异性互补区,重新设计引物,或者升高退火温度试试.
用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离:前沿分子的移动距离迁移率(m),蛋白质分子量(M)lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率(m)与蛋白质分子量(M)的对数成反比实验中用已知蛋白质分
出现非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2
开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只
后加电泳液的话液体溢过胶体时的流动容易把蛋白质样本冲出其所在的井.而且这样做容易在胶体四周留下液体无法进入的空隙,可能影响电泳效果.应该是这样
请问蛋白marker染出来没?如果maker都没染出来,加上考马斯亮蓝染色液重复使用的话,八成是染液出问题了,我就遇到过这样的情况,重新配下染色液,过滤后再染胶试试看.(前提是Loadingbuffe