提DNA条带不正常

那就是PCR的问题了,建议用新的试剂再试下,最好先把反应液,酶,引物按比例先配好,再取混合液加引物

土壤环境太复杂,直接从土壤中分离的DNA,有些时候会含有影响PCR效率的抑制剂（各种稀奇古怪的离子,蛋白什么的）,最好用专门的土壤DNA提取Kit,还不行的话,得再做进一步的纯化了（过柱去离子,酚氯仿

会降解的吧不负责任建议：你把图片保存,然后全部回收,扔冰箱里明天再对应着看~~~~~或者你直接打电话给教授,网上用QQ之类的讨论也一样,反正都是电子图片

中间的是RNA

菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.我知道一家做这些,[威斯腾生物].感觉还可以

600是多在中间,还是加在一头?其他的序列还一样吗?说具体一些如果是在中间,扩增的是cDNA的话,有可能是mRNA的alternativesplicing

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

这样看你的OD值是多少,太低的话跑胶不一定能看到条带.除此之外,还可以检查一下你跑胶过程中是不是有问题,比如说没有加EB,电泳方向是否正确,DNA样品过度稀释,凝胶成像系统有问题等等.

一般Marker中亮的条带是100ng,其他的条带是50ng.可以看到你回收之后的条带亮度估计在10ng~30ng左右,如果你的上样体积为10ul,则浓度应该是1ng~3ng/ul,这个浓度是很低的,

非特异性扩增优化下pcr条件在不行的话就重新设计引物

核酸电泳时使用的是EB染料吗?如果提取的样品中还有较多的RNA,RNA分子量较小,电泳时跑在前面,会结合较多的EB,影响DNA的观察,建议RNA酶37度消化30分钟.再问：用的goldview。再答：

你这到底是切过了还是没切就跑胶啊.再问：我这个是作对照的，因为酶切时切不出来，所以做了这个，结果就这样了。再答：如果不是胶的染料问题就是回收的问题咯回收完测浓度没啊再问：测了，浓度有点低。但是我做双酶

试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来再问：我提出来的DNA杂质太多，PCR过后电泳，拖尾现象严

可能是菌的基因组DNA,不过基因组DNA是很大的,不只2k还有可能呢,是引物特异性不好,从转入质粒上克隆出了你的目的片段,但从菌基因组或者质粒序列上扩出来一个非特异

首先,检查你的agarosegel浓度.一般以0.8%为标准（0.8g琼脂糖+100mlTEbuffer）.如果你的目标片段较小（小于100bp）,请适当提高凝胶浓度（1.2%-1.5%）.其次,如果

与亮度直接相关的是DNA的量,一般以纳克表示.但是,一般点样时加入的DNA溶液是已知的,因此和浓度是等效的.

PCR扩增的结果和模板的质量有直接的关系,在PCR扩增中如果模板纯度高,很低的量都可以进行扩增的.提取细菌的DNA量不多但纯度高,即使DNA电泳检测不到条带,PCR仍然能扩出条带.希望你看明白了.

如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况：1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.

看你提的什么DNA,基因组的话,是不好看,要是质粒,一般都会非常好看的,如果有蛋白质,点样孔会发亮并在附近有拖尾,但不影响判带的,RNA的话会比较麻烦,你可以用RNAase处理下就行了

能的.因为DGGE是部分变性,所以切胶回收后经过复性即可.根据你的酶切位点连接到载体上就可以送去测序了.不过有点奇怪为什么你想测序呢?