琼脂糖电泳DNA在点样孔中会不会扩散
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/18 19:57:41
你给的信息的确很少了.楼上2位都分析的很好,不过,我补充说一下露姬雅关于质粒三条带的解释.现在对于3条带的解释是这样的:最前面跑最快的是超螺旋,质粒是超螺旋的,你电泳的时候最亮很正常;中间的是开环质粒
其实做完的胶6到8小时之内应该都可以用,时间太长了失水量太大可能会影响电泳结果,在缓冲液里多泡一会就能用了.用胶这个事吧,其实弹性挺大的,要是随便检测个质粒啊啥的就无所谓了,但是如果是重要的结果,还是
主要是看tris的缓冲范围,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,算是中性和偏碱性.DNA肯定是要带负电荷的,所以电泳的时候才会向正极跑.电泳槽一般都会标明正负极的,只要把电源和电泳槽
1.你需要知道琼脂糖胶的分辨率是有限的,通常用的1%的琼脂糖胶是不能有效分辨相差100bp以内的片段的(这一点不能说明你的问题);2.你还需要知道基因组是很大的,通常都是以M为单位的,而琼脂糖胶分辨最
主要是看tris的缓冲范围,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,算是中性和偏碱性.DNA肯定是要带负电荷的,所以电泳的时候才会向正极跑.
不可以,常用tae再答:可以用绣花已定再答:但是是致癌物,所以小心再问:为什么呀?tris-hcl说明书说可以用于核酸电泳?溴化乙锭能否用无毒的物质代替?再答:可能是可以做某种配方的一部分组分吧,单独
根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标
单酶切?双酶切?一个位点?两个位点?单酶切一个位点,完全一条带,不完全两条带,单酶切两个位点,完全,两条带,不完全,三条带,双酶切,完全两条带,不完全,三条带再问:若是单酶切两个位点,出现一条带是什么
蛋白质,另外可能还有糖类之类的,如糖蛋白,多糖,所以整体黏糊糊的,跑不出点样空!
点完样再加缓冲液,样品会被冲出来,另外不加缓冲液就拔梳子,孔道容易变形,不规则,
这个真没尝试过,不过我们一般就用TAE缓冲液,这个也不难配置啊.再问:乙二胺四乙酸用完了,不想去买了,有什么替代品没?再答:额~这个我还真不知道,买一个没不贵吧,不好意思了,看看有没有经验的前辈帮帮你
你说的SDS电泳实际上是SDS-PAGE,SDS只是蛋白变性剂,而凝胶是聚丙烯酰胺.SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳使用的是完全不同的凝胶材料.SDS-PAGE采用的是聚丙烯酰胺,它是靠化学反应形成的
目前为止,对身体低毒、稳定而灵敏度不输于EB的核酸染料只有sybrgreen,和gelred这两个的优点都是低毒性,而且稳定性很高,但是sybrgreen的灵敏度不如EB,且背景荧光很强,但普通的核酸
多大浓度的胶?加样孔在上面还是下面?marker多大,尤其最亮那条带是多少?另外,marker好像是在最右边啊.再问:0.8的胶。写错了,从左向右。marker最右边。加样孔在上面。只求能分析清楚每个
应该模板量太大了,可以稀释一下模板;也可调整一下PCR体系,凭经验,如果模板纯度很高,取0.1微就足够了
阴性对照的actin可能是从旁边的加样孔漏过去的,也可能是加样的时候没换枪头带过去的,不要太在意这个阴性对照. gene1结果似乎不错,至少阴性对照比actin好,不过好像也漏过去一些. gene
琼脂糖电泳一般用来鉴定dna,蛋白质要用聚丙烯酰胺,这是规矩
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况:1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.
电泳成像体系:凝胶是否正常,是否添加EB(溴化乙啶)或EB是否降解了,上样时是否样品大量泄露,凝胶成像系统能否正常工作.由于,你的母液DNA相当于正对照,该正对照有正常的显色结果,这表明电泳成像体系运