RNA 跑胶三条带 28s为什么是18s的两倍
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 09:38:38
核糖体RNA的含量最高,因此这三条带最明显,可是其实不只是这三条,可能你们实验条件有限,只看到3条了,我实验中有时候能看到很多条
如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.
不太清楚你问题的意思.1.如果你是说遗传物质是DNA还是RNA的话,那么只要有细胞结构,遗传物质一定是DNA.(细菌就是有细胞结构的)2.如果你是说细菌含有DNA还是RNA,那么细菌既有DNA,又有R
生物体内一般含有核糖体RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)三种主要的RNA,其中rRNA含量最多,提取组织总RNA所得最多的就是rRNA.真核生物中含有5S、5.8S、1
应该是DNA污染~你用DNase处理下RNA提取物再用EDTA终止DNase活性~在跑下看看~一般都是DNA污染~才会在那个位置~
正常条件下28S亮度为18S的2倍,如果18S亮说明存在降解(因为28S比18S容易降解),后面的实验就要慎重考虑是否继续.
希望大家帮忙解释一下.\x0d另外,假如要拿这种RNA做对照,最好是同一个种的,要不然就会有大小上的指示差异.\x0d跑的是DNAmarker.使用都是相同物种的材料,这有没有可能与电泳条件有关,比如
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
RNA在外界容易降解,所以在体外用DNA.这样比较容易操作.
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
核酸电泳时使用的是EB染料吗?如果提取的样品中还有较多的RNA,RNA分子量较小,电泳时跑在前面,会结合较多的EB,影响DNA的观察,建议RNA酶37度消化30分钟.再问:用的goldview。再答:
这就是特异性不好,建议做如下改进:1,控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入;2,严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试;3,做二阶段温度pcr,先用稍高退
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关.DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性.
总共三条带,从大到小依次是28S,18S,5S,亮度依次递减.正常情况应该是28S比18S条带亮,宽度是它的2倍,5S则很淡
提取的是总RNA的话,电泳肯定是可以看到条带的...这样的量,提取没有问题的话,直接用常规的1%-2%核酸胶就可以看到rRNA的条带(真核生物核糖体中通常含28S、18S、5.8S和5S四种rRNA;
5s是不是很亮的一片拖尾,如果是的话,就是降解了.如果你是做RT,不妨接着试一次,记得设好阴性和阳性对照;如果做Northern,那就重提吧.鸡肝RNAase多,提取时小心些.
一般来说,28S的rRNA长度大概为4700碱基,而18S的rRNA为1900碱基,跑胶染色后,长度大的就会比较量,根据理论,28S的亮度是18S的两倍来确定RNA的完整性,但不是所有物种都这样.
首先怀疑,特异性不好,解决办法:1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍;2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环(也就是在
greenview没用过,只用过EB.我不在甲醛胶里加EB,好像那样背景比较高.我都是在变性RNA时在RNA loading buffer里加EB,胶上没什么背景.你先试一下看看吧