液相色谱中如何调节样品组分的保留时间,原理是什么
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/06 12:14:59
液相色谱中如何调节样品组分的保留时间,原理是什么
当所得的色谱峰的分离程度不理想时就是峰有重合的现象应该根据什么原理来调节梯度分离的程序或者改变流动相?
当所得的色谱峰的分离程度不理想时就是峰有重合的现象应该根据什么原理来调节梯度分离的程序或者改变流动相?
估计你做的是反相HPLC吧?如果是梯度洗脱,可以从这几方面来考虑:
1.柱子,很多人觉得应该先考虑流动相,但实际上柱子是必须首先考虑的一个因素.一个色谱条件在不同的柱子上都能重现的话,方法的耐用性也就比较理想了.柱子要考虑的因素有,粒径、表面孔径、碳载量、键合方式、封端方式等,简单点,多换几家品牌.
2.流动相的组成和改性剂,这个不用多说了.
3.梯度变化率,在出峰的时间点减慢梯度变化速度,要注意不同的系统梯度是有不同的滞后时间的.
4.柱温.
5.样品溶剂,尽量接近梯度起点.
最后补充一个:减小柱外效应.
1.柱子,很多人觉得应该先考虑流动相,但实际上柱子是必须首先考虑的一个因素.一个色谱条件在不同的柱子上都能重现的话,方法的耐用性也就比较理想了.柱子要考虑的因素有,粒径、表面孔径、碳载量、键合方式、封端方式等,简单点,多换几家品牌.
2.流动相的组成和改性剂,这个不用多说了.
3.梯度变化率,在出峰的时间点减慢梯度变化速度,要注意不同的系统梯度是有不同的滞后时间的.
4.柱温.
5.样品溶剂,尽量接近梯度起点.
最后补充一个:减小柱外效应.
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