作业帮RT-PCR是什么
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/09 02:51:29
RT-PCR是什么
RT-PCR简介
RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列.作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物.无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染.使用天为时代公司的总RNA提取系统（如目录号 DP405和DP406）,所获得的RNA的纯度高,基因组DNA污染少,用于RT-PCR系统可得到满意结果.用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种.对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可.
RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列.作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物.无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染.使用天为时代公司的总RNA提取系统（如目录号 DP405和DP406）,所获得的RNA的纯度高,基因组DNA污染少,用于RT-PCR系统可得到满意结果.用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种.对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可.