高效液相色谱的流动相如何选择?需考虑哪些因素?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/08 06:43:52

由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对组分的竞争.因此,正确选择流动相直接影响组分的分离度.对流动相溶剂的要求是：
（1）溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性.
（2）溶剂要与检测器匹配.对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长.所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量.可以在网上搜索一下溶剂的紫外截止波长.
对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度.
（3）高纯度.由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高.不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”.痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50～IOOnm.
（4）化学稳定性好.不能选与样品发生反应或聚合的溶剂.
(5)低粘度.若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离.常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等.但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离.

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