使用BAEE检测胰蛋白酶活性
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/08 09:14:18
使用BAEE检测胰蛋白酶活性
为什么胰蛋白酶要溶解在盐酸里呢?
我按照这个方法做,每次空白组和实验组在253nm处用酶标仪测都是显示over,请问一下这是怎么回事啊?
为什么胰蛋白酶要溶解在盐酸里呢?
我按照这个方法做,每次空白组和实验组在253nm处用酶标仪测都是显示over,请问一下这是怎么回事啊?
胰蛋白酶的水溶液在pH3时最稳定,故用盐酸液(0.001mol/L)配制,在pH7.6-8.8时酶活性最高,故酶解时以磷酸盐缓冲液(pH7.6)进行控制.至于为什么空白和实验组在253nm处都显示over,那就不清楚了.胰蛋白酶专一性地作用于赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的羧基组成的肽键、酰胺键及酯键,其水解速率:酯键>酰胺键>肽键.采用专属性较高的合成底物:N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE),在胰蛋白酶的作用下,底物被水解成苯酰酯-L-精氨酸,在253nm处的吸收度随酶促反应时间递增.
使用BAEE检测胰蛋白酶活性
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