流式细胞仪操作时经常写道:检测血小板可根据CD61 vs SSC设门.
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/25 20:21:10
流式细胞仪操作时经常写道:检测血小板可根据CD61 vs SSC设门.
侧向角散射(side scatter,SSC),
流式细胞仪依靠激光器照射细胞所携带的不同荧光物质所产生的不同的荧光进行检测.由于散射光不依赖任何细胞样品的制备技术(如染色),因此被称为细胞的物理参数或称固有参数.
侧向角散射是指与激光束正交90°方向的散射光信号,侧向散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信息.
另外还有前向角散射(forward scatter,FSC),前向角散射与被测细胞的大小有关,确切地说,它与细胞直径的平方值密切相关.通常在FCM应用中,选取FSC作阈值,来排除样品中的各种碎片及鞘液中的小颗粒,以避免对被测细胞的干扰.
利用这两个参数可以对细胞进行分群,通过设门就可以将具有一定ssc和fsc的细胞群从大量细胞中区分出来.
所说的设门,是指在进行检测时,所设的选择区域,可以用“门”选择感兴趣的细胞群.具体说,是指在某一张选定参数的直方图上,根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群,并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况.根据门的形状又分为了线性门,矩形门,圆形门,多边形门,任意形状门和十字门.
流式细胞这门技术比较复杂,染色和上机都需要操作人员有一定的经验
这里说到的根据CD61 vs SSC设门,应该就是说通过对CD61分子的染色和ssc参数设门,从而得到CD61分子阳性,并具有一定ssc值即有一定物理参数的细胞的数据.由于CD61是血小板的表面分子,因此可以得到血小板的相关数据.
流式细胞仪依靠激光器照射细胞所携带的不同荧光物质所产生的不同的荧光进行检测.由于散射光不依赖任何细胞样品的制备技术(如染色),因此被称为细胞的物理参数或称固有参数.
侧向角散射是指与激光束正交90°方向的散射光信号,侧向散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信息.
另外还有前向角散射(forward scatter,FSC),前向角散射与被测细胞的大小有关,确切地说,它与细胞直径的平方值密切相关.通常在FCM应用中,选取FSC作阈值,来排除样品中的各种碎片及鞘液中的小颗粒,以避免对被测细胞的干扰.
利用这两个参数可以对细胞进行分群,通过设门就可以将具有一定ssc和fsc的细胞群从大量细胞中区分出来.
所说的设门,是指在进行检测时,所设的选择区域,可以用“门”选择感兴趣的细胞群.具体说,是指在某一张选定参数的直方图上,根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群,并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况.根据门的形状又分为了线性门,矩形门,圆形门,多边形门,任意形状门和十字门.
流式细胞这门技术比较复杂,染色和上机都需要操作人员有一定的经验
这里说到的根据CD61 vs SSC设门,应该就是说通过对CD61分子的染色和ssc参数设门,从而得到CD61分子阳性,并具有一定ssc值即有一定物理参数的细胞的数据.由于CD61是血小板的表面分子,因此可以得到血小板的相关数据.