以齐墩果酸为标准品进行显色反应,紫外分光测OD值绘制标准曲线,结果测得的值总是偏低,什么原因呢?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/02 23:42:09
以齐墩果酸为标准品进行显色反应,紫外分光测OD值绘制标准曲线,结果测得的值总是偏低,什么原因呢?
称取0.0097g齐墩果酸无水乙醇溶解并定容至50ml制得浓度为0.194mg/ml标液,分别吸取标液0.00 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70ml于具塞试管中,80度水浴挥干溶剂,加入新配制5%香草醛冰乙酸溶液0.20ml,高氯酸1.2ml后70摄氏度水浴加热15min,流水冷却至室温后加入乙酸乙酯3.6ml,震荡后静置15min,550nm下测吸光度.
以上是所有的操作过程,自己测得的总是比文献所得的要小很多,比如0.7ml
的文献是0.947,自己测得的只有0.268.自己所得数据线性很好,
样品是之前剩下的不过一直放在干燥器里的.
移取标液应该是比较准确的,就算不准确也不会差这么多;
水浴锅其他同学都在用的,
香草醛冰乙酸溶液现配的,
高氯酸是新领的试剂,
以上三点应该不会有什么问题.
70摄氏度水浴时间控制还是比较好的,相差不会有几秒.
乙酸乙酯也是新领的试剂没有问题.
紫外分光光度计大家都在用的,应该没有不准吧.、
自己实在找不出问题出在哪里,
称取0.0097g齐墩果酸无水乙醇溶解并定容至50ml制得浓度为0.194mg/ml标液,分别吸取标液0.00 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70ml于具塞试管中,80度水浴挥干溶剂,加入新配制5%香草醛冰乙酸溶液0.20ml,高氯酸1.2ml后70摄氏度水浴加热15min,流水冷却至室温后加入乙酸乙酯3.6ml,震荡后静置15min,550nm下测吸光度.
以上是所有的操作过程,自己测得的总是比文献所得的要小很多,比如0.7ml
的文献是0.947,自己测得的只有0.268.自己所得数据线性很好,
样品是之前剩下的不过一直放在干燥器里的.
移取标液应该是比较准确的,就算不准确也不会差这么多;
水浴锅其他同学都在用的,
香草醛冰乙酸溶液现配的,
高氯酸是新领的试剂,
以上三点应该不会有什么问题.
70摄氏度水浴时间控制还是比较好的,相差不会有几秒.
乙酸乙酯也是新领的试剂没有问题.
紫外分光光度计大家都在用的,应该没有不准吧.、
自己实在找不出问题出在哪里,
线性好就好了,再做个加样回收,两个都能达到要求 ,吸光度值与文献报道不一致又有什么关系?影响吸光度的因素有很多很多,你的条件不可能和文献的条件一模一样,如香草醛浓度,冰乙酸浓度的微小变化都会影响显示反应.还有仪器的型号,吸收池的空白吸收等等都不一样.最后还有,很多文献的数据你觉得就那么可信么?依我经验文献只有50%可信度.
以齐墩果酸为标准品进行显色反应,紫外分光测OD值绘制标准曲线,结果测得的值总是偏低,什么原因呢?
测小鼠血糖时,同一葡萄糖标准液,用紫外可见分光光度计测的OD值差值有0.03,为什么?怎么避免呢?
分光光度计测得的标准曲线为什么不过原点
紫外分光光度计的标准曲线可以重复使用吗
分光光度计做标准曲线时以空白调零和水调零有什么区别?最后测得浓度是负值,但吸光度值又是正值?
齐墩果酸标准品英文名?
为什么我用分光光度计做测废水含氮量实验时,用于绘制标准曲线的点过于分散,这是由于哪些原因造成
elisa标准曲线是直线还是曲线?以浓度为横坐标,OD值为纵坐标
绘制标准曲线时,每个点应该测几次值?
为什么可见紫外分光光度计每次测定都得做标准曲线?
用紫外分光光度计测OD值,是不是待测液体的颜色越深OD值越大
紫杉醇 分光光度计测得标准曲线,最好用PBS 稀释的