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血清中磷酸化蛋白如何做WB

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/07/08 07:19:33
血清中磷酸化蛋白如何做WB
嗯,磷酸化蛋白的抗体一定要选好,最好不要买santa的,可以买upstate的,就是millipore的,或者abcam的.
第一,血清成分复杂,最好用密理博的Montage Albumin Deplete Kit去除血清里50%的白蛋白
第二,磷酸化蛋白提取蛋白的时候,最好加入原钒酸钠,和磷酸酶抑制剂,防止蛋白脱磷酸化.
第三,不要用牛奶做封闭剂,用BSA.因为牛奶中含有磷酸化酪蛋白,防止非特异带.
第四,如果条带杂带多,而且,条带弱,可以选择millipore的signal boost,增加条带特异性,而且,增强条带的亮度.
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