我构建一个H2B-pEGFP-N1载体,但是pcr鉴定正常,酶切鉴定就是没有急死啦,感受态,酶切时间和酶都换过了

为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! PCR产物的酶切问题PCR产物进行taqI内切酶酶切鉴定 结果出现了几条杂带 分析原因可能为条带内切不完全导致 昨晚酶切 检测目的基因是不是只有酶切鉴定、PCR后电泳、测序这三种方法? pegfp-n1能在原核中表达吗?就是在导入了pEGFP-N1这个质粒后,在大肠杆菌中能表达GFP蛋白吗? 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶 为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴定正确后 测序却完全不同?信号中断? 在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊? 关于PCR产物酶切要构建一个载体目的基因PCR回收后做双酶切应该做多大的体系50 or 100?各种成分为多少?望大家不 有哪家公司做腺病毒载体构建、包装、纯化、鉴定,请问如何收费的呢? 我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因. 你的回答对我帮助很大!请问,黄曲霉有没有用PCR进行鉴定的方法?就是他是否有一个区别与其他曲霉的看家基因,只要PCR能克