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一学生用蓝白斑做阳性克隆筛选,因为疏忽没有在选择性培养基中添加X-gal,结果长出的菌斑全为白色

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/03 05:28:30
一学生用蓝白斑做阳性克隆筛选,因为疏忽没有在选择性培养基中添加X-gal,结果长出的菌斑全为白色
试问:(1)这些白斑是否全为阳性克隆,形成白斑的原理是什么?
(2)如果不是,如何从这些白斑中选择真正阳性克隆
1 不是.因为没有生色底物,阴性菌落虽然可以表达lacZ,但无法显色.
2 全部转接至含X-gal的新鲜选择培养基上,培养后看是否为白色.要么以pcr法对所有菌落作鉴定.或者所有菌落转接至液体培养基扩增后抽质粒,看质粒大小.