PCR产物电泳结果分析
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/05 23:39:20
PCR产物电泳结果分析
我在做PCR时,对产物进行检测时得到以下的电泳图,想请大师给我分析分析,谢谢.最左边的是简易Marker.
基因组样品的模板量摸一个浓度吧,这个模板浓度不太合适.PCR产物以smear的形式出现,要么是样本降解,要么就是完全没有特异的扩增.
要通过PCR筛选基因敲除的小鼠,最基本的要求就是引物特异性好,扩增效率高.不然没法筛选的.如果这对引物之前筛选过,你可以换换模板,重新合成下引物就行,如果完全没有用于筛选,或者没能用基因组扩增过,就需要从引物着手考虑了.
这个条件看起来完全没有特异扩增,可以先尝试提高退火温度,或者是用touchdown PCR试试,如果还是不行,我就建议重新设计引物了.有可能的话,以基因组为模板设计引物,以避免其他区域的干扰.
要通过PCR筛选基因敲除的小鼠,最基本的要求就是引物特异性好,扩增效率高.不然没法筛选的.如果这对引物之前筛选过,你可以换换模板,重新合成下引物就行,如果完全没有用于筛选,或者没能用基因组扩增过,就需要从引物着手考虑了.
这个条件看起来完全没有特异扩增,可以先尝试提高退火温度,或者是用touchdown PCR试试,如果还是不行,我就建议重新设计引物了.有可能的话,以基因组为模板设计引物,以避免其他区域的干扰.
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求高手分析PCR电泳图
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