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请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/04 15:05:41
请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?
我的学植物的老师说应该从ATG开始,可是我的学动物的同学说可以从ATG的上游开始,因为他只是个载体的作用.我没学过生物.请问应该采取哪种方法?为什么?
没有关系的,不影响,只要PCR能p出ATG不影响基因表达就OK,多几个上游碱基没事.关键不在这里在于设计的引物要符合引物设计的基本原则,越符合越好.
再问: 你好,以DNA作模板,和以mRNA为模板,是否情况不同呢?我跟植物学的老师讨论,他说由于cDNA较短,必须以ATG为模板。是这样吗?
再答: 多短啊,只要大于100bp应该没啥问题吧。cDNA也是mRNA反转录过来的,mRNA不能直接做模板。上游引物和下游引物加起来肯定要小于CDNA。 不明白你要做什么实验?如果是克隆基因然后表达,与ATG没啥关系。只要以后PCR出来的序列有ATG就行啊。如果仅仅鉴别是否有某种基因表达,从那设计都无所谓。如果做real time PCR更与ATG没关系了