作业帮关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/09 01:02:53
关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,
PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?
3.PCR反应程序
细菌16SrDNA V3区扩增：95°C 5min；93°C 30 s,65°C 40 s,72°C 1 min,10个循环；93°C 30 s,60°C 40 s,72°C 1 min,10个循环；93°C 30 s,55°C 40 s,72°C 1 min,9个循环；93°C 30 s,55°C 40 s,720C 5min.
下图为PCR电泳图（最底下的条带为目的条带,上面有非特异性条带）
下图为当时提的DNA图
PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?
3.PCR反应程序
细菌16SrDNA V3区扩增：95°C 5min；93°C 30 s,65°C 40 s,72°C 1 min,10个循环；93°C 30 s,60°C 40 s,72°C 1 min,10个循环；93°C 30 s,55°C 40 s,72°C 1 min,9个循环；93°C 30 s,55°C 40 s,720C 5min.
下图为PCR电泳图（最底下的条带为目的条带,上面有非特异性条带）
下图为当时提的DNA图
建议做一个梯度退火温度来找到最佳的退火温度,然后再进行大量PCR!
出现非特异性条带还有可能是引物设计时的问题!
出现非特异性条带还有可能是引物设计时的问题!