DNA连接酶的问题简要的说,DNA连接酶有没有专一性?不同黏性末端或者平末端是否能够用同一种DNA连接酶?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/18 07:57:32
DNA连接酶的问题
简要的说,DNA连接酶有没有专一性?不同黏性末端或者平末端是否能够用同一种DNA连接酶?
简要的说,DNA连接酶有没有专一性?不同黏性末端或者平末端是否能够用同一种DNA连接酶?
1.DNA连接酶没有专一性,只要在一条DNA链的3’末端具有一个游离的羟基(一OH),而在另一条DNA链的5’末端具有一个磷酸基(一P)的情况下,就能发挥其作用.
2.不同黏性末端或者平末端能够用同一种DNA连接酶连接,但不是所有连接酶都可以做到这一点.比如T4噬菌体DNA连接酶,但连接平末端的双链DNA分子的反应速率要比黏性末端连接慢得多,低浓度PEG可提高平末端连接速率;大肠杆菌DNA连接酶只能催化互相匹配黏端的5’突出端与3’突出端的双链DNA之间的连接,不能催化双链DNA片段平末端之间的连接.
3.也有一种连接酶可以做到特异性,即热稳定的DNA连接酶.它是一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶.使用此种DNA连接酶进行体外连接,便可明显降低形成非特异性连接产物的机率.
具体过程为:将热变性的DNA和与靶重复序列两条链之一互补的寡聚核苷酸在接近熔点的温度下杂交.然后加人热稳定的DNA连接酶共价连接那些没有间隙隔开的寡聚核苦酸.通过变性将连接产物与模板分开,结果产生单链DNA分子的混合物.
2.不同黏性末端或者平末端能够用同一种DNA连接酶连接,但不是所有连接酶都可以做到这一点.比如T4噬菌体DNA连接酶,但连接平末端的双链DNA分子的反应速率要比黏性末端连接慢得多,低浓度PEG可提高平末端连接速率;大肠杆菌DNA连接酶只能催化互相匹配黏端的5’突出端与3’突出端的双链DNA之间的连接,不能催化双链DNA片段平末端之间的连接.
3.也有一种连接酶可以做到特异性,即热稳定的DNA连接酶.它是一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶.使用此种DNA连接酶进行体外连接,便可明显降低形成非特异性连接产物的机率.
具体过程为:将热变性的DNA和与靶重复序列两条链之一互补的寡聚核苷酸在接近熔点的温度下杂交.然后加人热稳定的DNA连接酶共价连接那些没有间隙隔开的寡聚核苦酸.通过变性将连接产物与模板分开,结果产生单链DNA分子的混合物.
【DNA重组技术】不同的平末端可以用DNA连接酶连起来吗?
DNA连接酶把目的基因与载体的黏性末端的碱基对连接起来,
DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来
DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来,
T4连接酶可以连接平末端,一样可以连接粘性末端,好像比DNA连接酶厉害的感觉,为什么通常都用DNA连接酶?
基因工程题DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 这句话对吗?答案是对的,可是连接酶不是连得磷酸二酯键吗
用不同的限制性内切酶(形成的是平口末端)能否用DNA连接酶进行连接
冈崎片段为什么要用DNA连接酶连接?DNA连接酶不是只作用于平末端或者粘性末端吗?
关于小型环状DNA,DNA连接酶催化互补的粘性末端,碱基之间形成氢键吗
DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA这句话怎么错了
DNA连接酶连接粘性末端的碱基对为什么是错的啊
dna连接酶使粘性末端的碱基之间形成氢键 哪里错