求救分子生物学一题,关于基因或蛋白筛选的

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/06 03:38:03

求救分子生物学一题,关于基因或蛋白筛选的
假设你有2份水稻材料,野生型(WT)和由WT经γ射线诱变而来的突变体(M).WT在生长发育的任何时期叶片均不会自发产生锈斑,而M在生长至30天时,在无任何病虫诱导情况下,其叶片自发产生锈斑,这种锈斑的产生可能与程序性细胞死亡（Programmed Cell Death,PCD）相关.请利用你学过的知识,设计一个实验,阐明哪些基因或蛋白可能参与M中锈斑的产生.请注明实验材料,实验方法及实验具体方案.告诉我实验设计和操作流程图（要是能够详细一点就更好了）就好啦,步骤网上都有的

这个用扣除杂交就行,将30天的M的RNA提取出来反转录为cDNA.然后将30天的WT的RNA提取出来,与cDNA进行杂交,然后将混合液通过羟基磷灰石柱.由于M中有特异表达的基因,所以WT的RNA不能与之杂交,这些单链形式的cDNA便留在柱子上.将cDNA洗脱下来就得到了可能参与锈斑产生的基因或其片段.
想直接得到蛋白的话可能会困难一点儿,在这里只提供思路,我对蛋白的研究技术了解的不是太多.分别提取30天的M与WT的蛋白质进行脉冲场电泳,分析存在差异的蛋白条带,就能发现与锈斑产生相关的蛋白.
其实方法有很多,参照基因工程课本里提到的方法你还会发现更多的寻找差异基因的办法.例如差别杂交、DDRT-PCR、等.

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