用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/06 16:41:31
用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法
在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的蛋白本身的抗体能检测到蛋白的表达,而用抗flag的抗体却无法检测到目的大小的条带,flag标签是载体自带的,抗体也是经验证无误的,我感到很困惑的是,为什么用flag的抗体检测不到目的条带呢?
在确保western条件没有问题的情况下,我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时,用目的蛋白本身的抗体能检测到蛋白的表达,而用抗flag的抗体却无法检测到目的大小的条带,flag标签是载体自带的,抗体也是经验证无误的,我感到很困惑的是,为什么用flag的抗体检测不到目的条带呢?
看你的flag抗体是否有问题,我是做抗体生产的,原来开发flag抗体时就会对其进行C端、N端、M端的Qc检测,正常情况下三端都需要有识别,我担心你的抗flag抗体有可能不识别N端,还有一种可能就是你的融合蛋白不含flag标签.你可以从这两个方面入手解决,至于你运用什么实验设计,我想你应该完全没问题.预祝你能够顺利解决此疑问.
用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法
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