关于PCR PCR技术中,引物是不是可以与模板DNA单链的一端,而非顶端结合呢?要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/14 07:53:56
关于PCR
PCR技术中,引物是不是可以与模板DNA单链的一端,而非顶端结合呢?要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合的话,模板链怎么延长呢,敬请赐教
PCR技术中,引物是不是可以与模板DNA单链的一端,而非顶端结合呢?要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合的话,模板链怎么延长呢,敬请赐教
1.引物可以与模板DNA的任何与之互补的序列位置结合,无论是一端还是顶端;
2.要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合,且大小一致,就不是PCR了,而是核酸杂交.且即使如此,DNA聚合酶与模板DNA结合后,无延伸的模板(平端),所以不会延伸了.
再问: 那么通过PCR而得到与模板一样的DNA 链做什么呢?比方说是用于检测病毒吧,通过PCR怎么就知道有病毒DNA或RNA 呢?
再答: 一般PCR的主要目的是大量获得(扩增)所需要的目的基因片段。如,人体内感染的某一病毒的特异性量是很少的,直接取提取DNA电泳观察不到该基因存在与否,通过PCR可进行特异性的大量扩增,然后电泳就能观察到该基因的特异性条带,从而判断该定都的存在。设计引物时,选用的是该病毒特有的基因片段序列。 另外,RNA扩增时要先逆转录为cDNA,再用DNA聚合酶进行扩增,即RT-PCR。
再问: 经你那么一说,开始有点明白了,多谢了
2.要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合,且大小一致,就不是PCR了,而是核酸杂交.且即使如此,DNA聚合酶与模板DNA结合后,无延伸的模板(平端),所以不会延伸了.
再问: 那么通过PCR而得到与模板一样的DNA 链做什么呢?比方说是用于检测病毒吧,通过PCR怎么就知道有病毒DNA或RNA 呢?
再答: 一般PCR的主要目的是大量获得(扩增)所需要的目的基因片段。如,人体内感染的某一病毒的特异性量是很少的,直接取提取DNA电泳观察不到该基因存在与否,通过PCR可进行特异性的大量扩增,然后电泳就能观察到该基因的特异性条带,从而判断该定都的存在。设计引物时,选用的是该病毒特有的基因片段序列。 另外,RNA扩增时要先逆转录为cDNA,再用DNA聚合酶进行扩增,即RT-PCR。
再问: 经你那么一说,开始有点明白了,多谢了
关于PCR PCR技术中,引物是不是可以与模板DNA单链的一端,而非顶端结合呢?要是引物所有的碱基对与模板链碱基对都结合
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