MTS法测定细胞增殖的原理?该方法与MTT法有何不同?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/02 16:09:07
MTS法测定细胞增殖的原理?该方法与MTT法有何不同?
我的课题是做一个药物的促增殖作用
但是药物本身具有还原性
使用MTT法的时候药物直接会和MTT发生显色反应
有人推荐MTS法
但是我对该方法不甚了解
请多多指教
我的课题是做一个药物的促增殖作用
但是药物本身具有还原性
使用MTT法的时候药物直接会和MTT发生显色反应
有人推荐MTS法
但是我对该方法不甚了解
请多多指教
MTS检测方法是检测细胞增殖、细胞毒性的常用方法.具体方法:
细胞生长检测:MTS检测法
1.培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞(检测IL-2),或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞(检测IL-3)到对数生长期.
2.取96孔细胞培养板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述细胞之一的DMEM培养液(加10%小牛血清).
3.每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子(IL-2或IL-3)样品或细胞因子标准品,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时.
4.每孔加20μl MTS/PMS混合液,继续培养3~4小时显色.
5.检测前摇晃培养板10秒钟,混匀颜色.在酶联检测仪上,波长570nm(或490nm,或570nm和690nm)处检测各孔的光吸收值(OD).用样品稀释度对OD值(OD570、OD490或OD570/OD690)绘制剂量-反应曲线,根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量.
细胞生长检测:MTS检测法
1.培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞(检测IL-2),或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞(检测IL-3)到对数生长期.
2.取96孔细胞培养板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述细胞之一的DMEM培养液(加10%小牛血清).
3.每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子(IL-2或IL-3)样品或细胞因子标准品,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时.
4.每孔加20μl MTS/PMS混合液,继续培养3~4小时显色.
5.检测前摇晃培养板10秒钟,混匀颜色.在酶联检测仪上,波长570nm(或490nm,或570nm和690nm)处检测各孔的光吸收值(OD).用样品稀释度对OD值(OD570、OD490或OD570/OD690)绘制剂量-反应曲线,根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量.
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