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基因工程中的质粒1、目的基因拼接到质粒上后要怎么表达,不是只有核染色体中DNA才可以表达基因吗?2、如果质粒上的目的基因

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/05 23:24:20
基因工程中的质粒
1、目的基因拼接到质粒上后要怎么表达,不是只有核染色体中DNA才可以表达基因吗?
2、如果质粒上的目的基因要整合到DNA中,那么整合过程是如何进行的?
3、基因工程第四步为目的基因的检验与测定,那么是如何进行的?
4、作为运载体的条件中有一个为有一定的标记基因,那么在操作过程中,如何检测标记基因?
1、目的基因拼接到表达载体(也就是含有表达元件的质粒)上,转化至宿主菌内就可以表达,是独立核染色体之外的.只要符合表达的条件,就可以表达,不一定非是核染色体上的基因.
2、一般情况下,质粒上的基因无需整合至核染色体上,也有一些宿主(如毕赤酵母),需先将表达载体线性化,再转化至酵母体内.整合的方式是随机的(插入、替代等),是通过同源重组进行的.
3、目的基因的检验与测定可以通过检测是否有目的蛋白表达的方法;也可以PCR验证.
4、标记基因是用来筛选阳性转化子的,一般为抗性基因,阳性转化子可以在含有相应抗生素的筛选平板上生长.