作业帮DNA凝胶电泳实验中EB的作用?EB即溴化乙锭,DNA诱变剂,作用机理是什么?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/05 19:40:18
DNA凝胶电泳实验中EB的作用?EB即溴化乙锭,DNA诱变剂,作用机理是什么?
1溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA.
2溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配.许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性.
溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄.
溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团.它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性.在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子.当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用.这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加.DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射.这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来.由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时,可以检测到少至10ng的DNA条带.
2溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配.许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性.
溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄.
溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团.它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性.在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子.当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用.这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加.DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射.这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来.由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时,可以检测到少至10ng的DNA条带.