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醋酸纤维薄膜电泳牛血清蛋白分离不好有什么具体的改进方法

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/03 09:50:18
醋酸纤维薄膜电泳牛血清蛋白分离不好有什么具体的改进方法
我们是武汉的,实验室内大概二十六七度,我们有五个小组都用pH为8.6的巴比妥缓冲液(1.66g巴比妥和12,.76g巴比妥钠定容至1000ml)来电泳,两个电极之间约为12cm,教材上是110V电泳1个小时,最低有用90V电泳一个小时,有用130V电泳一个小时(蛋白质后来变性了),有先用110V半个小时后再用150V电泳20min,最后效果都不太好,大部分只有两条带,极个别出现3条带,其他操作感觉问题都不太大,请问有什么具体的建议能让结果有所改进,
1将准备好的薄膜划线面朝下,与巴比妥——巴比妥钠缓冲液中充分浸透(约30min)
2,电泳开始的10min内电流调为0.3mA/CM膜宽,10min后调至0.6mA/cm膜宽.电泳60min,待电泳区带展开2.5-3.5cm时断电
3,漂洗时间与透明的时间掌握与浸液次序也很重要.
我当时用了人血清,五个条带都很清晰.参考文献来自《生物化学与分子生物学》,兰州大学出版社.祝您成功!