做荧光定量PCR时为什么有些需要热启动有些不用

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/06 02:18:08

热启动是为了提高特异性.需要热启动的试剂盒,Taq酶上加了一个封闭抗体,在不加热到设定的温度并维持一段时间前,抗体一直处于结合状态.这样,在没有到达优化温度时,taq没不发挥作用.就减少了非特异扩增的可能.“热启动”后,抗体失活,释放出Taq酶的活性中心.

做荧光定量PCR时为什么有些需要热启动有些不用荧光定量PCR一定要用热启动Taq酶吗? 请问做荧光定量PCR时每次都需要做标准曲线吗? 请问做实时荧光定量PCR实验时,为什么做标准曲线? 为什么在做有些带入求值问题时,有些需要讨论α角的正负,而有些就不用? 荧光定量pcr做荧光定量pcr的绝对定量时为什么要构建标准质粒,利用质粒构建标准曲线,为什么不直接用DNA模板构建标准曲在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 做荧光定量PCR前要做总RNA定量吗我做荧光定量PCR标准曲线时,斜率只有-1.25,扩增效率E很高.为什么呢? 荧光定量PCR步骤荧光定量pcr 荧光定量PCR RT-PCR