细胞培养的主要条件和注意事项以及使用的试剂
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/05 21:59:57
细胞培养的主要条件和注意事项以及使用的试剂
要做细胞培养的话,硬件条件包括:细胞室(最好带空气净化系统),超净工作台,培养箱,离心机,冰箱,显微镜(倒置),常规培养耗材及移液枪等.
操作原则:无菌(最基本的),培养环境的稳定(温湿度保持恒定,不轻易改变培养基及添加物等,传代换液时操作要快,尽可能缩短在培养箱外的操作时间)
使用的试剂有:培养基,PBS,传代用消化液,血清,抗生素(青链霉素),培养用添加物(非必需氨基酸,细胞生长因子等)
再问: 那么细胞系的建立的主要试剂需要些什么?一些传代培养的又需要些什么?
再答: 细胞建系的话,就涉及到采样的问题,为了避免污染的发生,在采样的源头就树立无菌概念很重要。采样时尽可能做到无菌,当然有时限于现场条件无法做到无菌采样,但也需要尽可能的做到干净。 采样时需要的主要试剂包括:组织表面消毒用试剂(常用酒精),组织采集后保存试剂(常用含2-5倍双抗的培养基或PBS),组织样品采集后,需要低温保存运输,在尽可能短的时间内拿到实验室进行下一步处理。 原代细胞系的建立常采用组织贴块培养法,或是胰蛋白酶消化法。 细胞传代培养用到的试剂基本三样:细胞传代前清洗细胞表面的PBS,细胞消化用的酶(胰蛋白酶或胶原蛋白酶等),完全培养基(含血清,抗生素,细胞培养添加物等)。
操作原则:无菌(最基本的),培养环境的稳定(温湿度保持恒定,不轻易改变培养基及添加物等,传代换液时操作要快,尽可能缩短在培养箱外的操作时间)
使用的试剂有:培养基,PBS,传代用消化液,血清,抗生素(青链霉素),培养用添加物(非必需氨基酸,细胞生长因子等)
再问: 那么细胞系的建立的主要试剂需要些什么?一些传代培养的又需要些什么?
再答: 细胞建系的话,就涉及到采样的问题,为了避免污染的发生,在采样的源头就树立无菌概念很重要。采样时尽可能做到无菌,当然有时限于现场条件无法做到无菌采样,但也需要尽可能的做到干净。 采样时需要的主要试剂包括:组织表面消毒用试剂(常用酒精),组织采集后保存试剂(常用含2-5倍双抗的培养基或PBS),组织样品采集后,需要低温保存运输,在尽可能短的时间内拿到实验室进行下一步处理。 原代细胞系的建立常采用组织贴块培养法,或是胰蛋白酶消化法。 细胞传代培养用到的试剂基本三样:细胞传代前清洗细胞表面的PBS,细胞消化用的酶(胰蛋白酶或胶原蛋白酶等),完全培养基(含血清,抗生素,细胞培养添加物等)。