作业帮请问谁知道赛百盛出品的GoldView核酸染料的具体情况?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/09 09:48:25
请问谁知道赛百盛出品的GoldView核酸染料的具体情况?
比如说：其成分是否为口丫啶橙,是否有致癌作用等.
比如说：其成分是否为口丫啶橙,是否有致癌作用等.
前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:
GoldViewTM 核酸染料——使用说明
概 述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同.在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光.GoldView不仅能染DNA,也可用于染RNA.
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂.因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择.
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化.
2.加入5µl GoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡.
3.冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳.
4.电泳完毕在紫外灯下观察.若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片.
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度.
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显.
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率.
4.虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套.
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所检验报告
实际上经过克隆实验的一轮循环的使用后,觉得在一些方面不太好用.
对于PCR产物来说,效果很好,但是对于胶回收后和微量片段的染色效果则不好,灵敏度很低.对于连接前,我会用1ul载体和1ul片段跑胶观察浓度以决定连接体系,以前用EB能清楚的看到,而用GV则看不到,需要用原来10倍体积的上样才能看到条带,可见在一些方面灵敏度很低.
介绍说GV无致癌作用,但是大家还是戴着手套进行操作,因为毕竟染色需要插入到DNA中,所以也许理论上来说GV还是有可能影响健康,现在的检验报告并不能代表10年的影响.
GoldViewTM 核酸染料——使用说明
概 述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同.在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光.GoldView不仅能染DNA,也可用于染RNA.
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂.因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择.
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化.
2.加入5µl GoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡.
3.冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳.
4.电泳完毕在紫外灯下观察.若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片.
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度.
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显.
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率.
4.虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套.
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所检验报告
实际上经过克隆实验的一轮循环的使用后,觉得在一些方面不太好用.
对于PCR产物来说,效果很好,但是对于胶回收后和微量片段的染色效果则不好,灵敏度很低.对于连接前,我会用1ul载体和1ul片段跑胶观察浓度以决定连接体系,以前用EB能清楚的看到,而用GV则看不到,需要用原来10倍体积的上样才能看到条带,可见在一些方面灵敏度很低.
介绍说GV无致癌作用,但是大家还是戴着手套进行操作,因为毕竟染色需要插入到DNA中,所以也许理论上来说GV还是有可能影响健康,现在的检验报告并不能代表10年的影响.