大肠杆菌是如何产生人的胰岛素?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/03 01:10:18
大肠杆菌是如何产生人的胰岛素?
要求:字数多一点,说的清楚一点的,
要求:字数多一点,说的清楚一点的,
嗯…基本步骤如下:
1、获取人胰岛素基因片段(获取外源基因)
有多种方法呢.鸟枪法(用一大堆限制性核酸内切酶对附近基因进行剪切,再提取所需要的.至于如何筛选,用DNA分子杂交,即DNA探针),人工合成法(根据转录蛋白或者mRNA推导出基因序列,然后人工合成,没有内含子),还有从基因文库中提取(也就是事先已经提取完毕的拿来用),以及PCR扩增技术(用于大量生产该段基因片段,用于商业化运作……)
2、将获得的人胰岛素基因片段与质粒结合(与运载体结合)
先得用同样的限制性核酸内切酶处理质粒,产生和人胰岛素基因片段相同的黏性末端(也可能是平末端),然后将两DNA分子用DNA连接酶结合在一起.关于运载体,首先需要有多处限制酶切点,然后还需要有一段标记基因,最后需要有能在受体细胞内稳定存在、自我复制并表达的能力.大肠杆菌内含质粒(独立于细菌本身的DNA,存在于细胞质内的小型环状DNA分子),且满足以上条件.
3、将质粒导入受体细胞
即将组装好的质粒导入大肠杆菌体内.
4、检测基因是否表达
即检测是否有人的胰岛素表达出来.方法基本有三种:DNA分子杂交,RNA分子杂交,蛋白质检测(抗原抗体特异性结合).大肠杆菌会表达稳定存在于质粒上的基因片段,依据的是中心法则:DNA——〉RNA——〉蛋白质.首先质粒上的片段解旋,RNA聚合酶嵌入启动子,然后开始合成mRNA,直到终止子.接下来运输至核糖体,有tRNA附带氨基酸随之而来,依据密码子(mRNA上)和反密码子(tRNA上)配对,固定下指定的氨基酸片段,然后脱水缩合成为多肽,继续于内质网中加工成成熟的人的胰岛素蛋白.
1、获取人胰岛素基因片段(获取外源基因)
有多种方法呢.鸟枪法(用一大堆限制性核酸内切酶对附近基因进行剪切,再提取所需要的.至于如何筛选,用DNA分子杂交,即DNA探针),人工合成法(根据转录蛋白或者mRNA推导出基因序列,然后人工合成,没有内含子),还有从基因文库中提取(也就是事先已经提取完毕的拿来用),以及PCR扩增技术(用于大量生产该段基因片段,用于商业化运作……)
2、将获得的人胰岛素基因片段与质粒结合(与运载体结合)
先得用同样的限制性核酸内切酶处理质粒,产生和人胰岛素基因片段相同的黏性末端(也可能是平末端),然后将两DNA分子用DNA连接酶结合在一起.关于运载体,首先需要有多处限制酶切点,然后还需要有一段标记基因,最后需要有能在受体细胞内稳定存在、自我复制并表达的能力.大肠杆菌内含质粒(独立于细菌本身的DNA,存在于细胞质内的小型环状DNA分子),且满足以上条件.
3、将质粒导入受体细胞
即将组装好的质粒导入大肠杆菌体内.
4、检测基因是否表达
即检测是否有人的胰岛素表达出来.方法基本有三种:DNA分子杂交,RNA分子杂交,蛋白质检测(抗原抗体特异性结合).大肠杆菌会表达稳定存在于质粒上的基因片段,依据的是中心法则:DNA——〉RNA——〉蛋白质.首先质粒上的片段解旋,RNA聚合酶嵌入启动子,然后开始合成mRNA,直到终止子.接下来运输至核糖体,有tRNA附带氨基酸随之而来,依据密码子(mRNA上)和反密码子(tRNA上)配对,固定下指定的氨基酸片段,然后脱水缩合成为多肽,继续于内质网中加工成成熟的人的胰岛素蛋白.
大肠杆菌是如何产生人的胰岛素?
科学家通过基因工程 使大肠杆菌产生人的胰岛素.下面叙述错的是
利用大肠杆菌生产胰岛素的原理是( )
合成胰岛素的基因导入大肠杆菌是为什么?
在胰岛素基因转给大肠杆菌后,参与基因工程合成胰岛素的细胞器与结构是
人怎么产生人怎么来的
利用转基因技术,培养大量大肠杆菌,来生产胰岛素.大肠杆菌就是生物反应器
转入胰岛素基因的大肠杆菌合成胰岛素时
为什么大肠杆菌能生产人的胰岛素?
人胰岛素基因通过质粒导入大肠杆菌并成功表达人胰岛素原,下列错误的是
(选做题)下面是利用大肠杆菌生产人胰岛素的有关问题,请回答: (1)利用大肠杆菌生产人胰岛素必须应用__________
基因工程问题1、当目的基因为合成胰岛素的DNA序列时,用大肠杆菌作为受体细胞,但储存在大肠杆菌中的目的基因又是如何跑到人